2012年1月，由LGR公司發(fā)明的專利Method For Analysis Of Isotopes In Bodily Fluids在美國獲得批準(zhǔn)。專利發(fā)明人Douglas Steven Baer及其伙伴創(chuàng)造性的應(yīng)用LGR水同位素分析儀912-0032，成功的測量了生物體細(xì)胞液中的氫氧同位素δ18O, δ17O和δ2H。該方法區(qū)別于傳統(tǒng)的同位素比質(zhì)譜儀法，不會在對樣品的前處理過程中產(chǎn)生分餾，同時，測量結(jié)果也不會受到細(xì)胞液中其他物質(zhì)的干擾。
其基本前處理方法如下：
將30~250 μL（典型為200 μL）的樣品加入到離心管中，加入5 mg ZnSO4，以8000rpm的轉(zhuǎn)速離心10 min，取10~75 μL上清液，然后直接用LGR水同位素分析儀（912-0032）進(jìn)行測定。加入ZnSO4是為了沉淀蛋白質(zhì)，原理是金屬離子對蛋白質(zhì)有親和作用，可以引發(fā)形成蛋白質(zhì)交聯(lián)，形成沉淀，也可用到其他金屬離子如（Ca / Al / Cu），陰離子一般用氯化物或者是硫酸根。同時，該專利中還提到，以前的一些分離蛋白質(zhì)的方法不適合用此設(shè)備，具體方法如下：
1、用鹽析來沉淀蛋白質(zhì)，鹽析去除效率只有90%，并不完全，并且高濃度的鹽本身對測試結(jié)果會有影響；
2、有一種稱之為Cohn process的方法，通過加入乙醇或者其他有機(jī)溶劑（甲醇、丙酮、乙二醇、三氯乙酸、肼）來沉淀蛋白質(zhì)，乙醇的加入導(dǎo)致PH降低，蛋白質(zhì)被沉淀下來，但是乙醇或其他類似有機(jī)溶劑中的H會與H2O中的H發(fā)生置換反應(yīng)，影響測定結(jié)果，這可能就是之前提到的為啥醇類物質(zhì)對測定結(jié)果會有影響的原因；
3、通過有機(jī)聚合物來沉淀蛋白質(zhì)，該有機(jī)物通常是聚乙二醇，同上，同樣不適用；
4、通過加酸到樣品中，與蛋白中的氨基形成不溶性的鹽，但是酸化后形成的NH4+中的H同樣會與H2O發(fā)生置換反應(yīng)；
5、絮凝。通過加入藻酸鹽、角叉菜膠、單寧酸來去除蛋白質(zhì)，該方法產(chǎn)生的效應(yīng)與Cohn process一樣。
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